为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿﹣异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿﹣异戊醇,蛋白质等溶于氯仿﹣异戊醇.分析回答:
①将液氮冷冻的组织研磨成粉末
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②分别用A、B、C三种不同方法处理
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③DNA粗提液在65℃水浴保温60min,搅拌均匀
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④加氯仿﹣异戊醇,离心取?,加冷酒精,收集沉淀
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⑤加入RNA酶,37℃水浴保温20min,重复步骤④
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⑥将沉淀室温干燥后,溶于超纯水中,﹣20℃保存备用
结果检测
组织 | 方法 | 组别 | OD260/OD230 | OD260/OD280 | 得率/μg•mg﹣1 |
嫩叶 | A方法 | A1 | 1.970 | 1.821 | 0.105 |
B方法 | B1 | 1.973 | 1.719 | 0.096 |
C方法 | Cl | 1.647 | 1.568 | 0.082 |
块根 | A方法 | A2 | 1.888 | 1.888 | 0.029 |
B方法 | B2 | 1.811 | 1.682 | 0.030 |
C方法 | C2 | 1.376 | 1.320 | 0.020 |
注:①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多;②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留,若小于1.8表示存在蛋白质残留.③得率是指每毫克组织所提取的DNA量.