骨髓瘤细胞由于缺乏X酶，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长；而B淋巴细胞能产生X酶。某科研小组制备单克隆抗体的步骤如下：

①给小鼠注射特定抗原，一段时间后获取B淋巴细胞；

②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合后，诱导细胞融合；

③将融合后的细胞在HAT筛选培养液中培养，获得杂交瘤细胞；

④进行第二次筛选；

⑤体外培养，获得单克隆抗体。

回答下列问题：