下面是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是（   ）

A、在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B、划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上

C、接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的

D、第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数