在孟德尔的豌豆杂交实验中，必须对母本采取的措施是(      ）

①开花前人工去雄   ②开花后人工去雄     ③自花受粉前人工去雄    ④去雄后自然受粉   ⑤去雄后人工授粉     ⑥人工授粉后套袋隔离     ⑦人工授粉后自然发育

A、①④⑦

B、②④⑥

C、③⑤⑥

D、①⑤⑥