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大肠菌群是指一类在35~37 ℃条件下培养48 h,能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称,大肠杆菌属于大肠菌群的一种。我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准是:一、细菌总数1 mL水中不超过100个;二、大肠杆菌数1 L水中不超过3个。国标一般采用多管发酵法检测样品中大肠菌群数,具体分为三步:

蛋白胨

10.0

牛肉膏

3.0

乳糖

5.0

氯化钠

5.0

pH

7.3±0.2

H2O

定容至1000 mL

①初发酵试验:将待测样品稀释后,选择3个稀释度,每个稀释度分别接种到5支发酵管中,37 ℃培养48 h,观察是否产气。

②平板分离:将产气发酵管中的菌液分别接种于伊红美蓝培养基(生长在此培养基上的大肠菌群呈深紫色,有金属光泽)上,置于37℃恒温箱内培养24h,观察菌落形态。

③复发酵试验:挑取平板上呈深紫色,有金属光泽的菌落,进行染色镜检。将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。最后根据证实为大肠杆菌阳性的管数,按统计学原理即可得出大肠菌群数(每升或每100 毫升中的个数)。

知识点
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