下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（   ）

A、①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基

B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

C、③到④的过程中，接种环共灼烧了5次

D、④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连