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细胞表面的B分子(受B基因控制)具有重要作用,研究发现肿瘤细胞B基因不表达或低表达。为验证B基因表达对小鼠前胃癌细胞(MFC)的影响,科研人员利用下列材料和用具进行了实验。

材料与用具:MFC悬液、含有B基因的真核细胞表达载体pcDNA3、不含B基因的真核细胞表达载体pcDNA3(空白载体)、动物细胞培养液、卡氏瓶、流式细胞仪(可以测定每个细胞内DNA含量从而确定细胞所处时期)等。

实验思路:

①____。

②体外细胞培养实验:分别将MFC、含有外源B基因的MFC(记作MFCB+)、含有空白载体的MFC(记作MFCB-)等量接种于动物细胞培养基中,一段时间后用流式细胞仪检测三组细胞的细胞周期情况。结果如下表:

组别

G0/G1(%)

S(%)

G2/M(%)

总计(%)

MFC

55.0

31.1

13.9

100.0

MFCB+

66.7

19.6

13.7

100.0

MFCB-

54.7

30.7

14.6

100.0

(备注:G0期为静止期,此时期细胞暂不分裂)

③体内细胞培养实验:将适量的MFC、MFCB+和MFCB-分别接种于去除胸腺的三组小鼠(裸鼠)体内,接种后每天测量计算裸鼠体内肿瘤体积大小,并记录。

回答下列问题:

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