下列有关基因工程的叙述正确的是（  ）

A、限制酶、DNA连接酶和解旋酶作用的化学键都是两个核苷酸之间的磷酸二酯键

B、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，能够识别双链DNA分子中的某种特定的核苷酸序列

C、用氯化钙处理植物细胞，可增加细胞壁的通透性

D、基因工程所需载体有质粒、细菌拟核等，至少要有一个限制酶识别位点