纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素的一种）的圆形滤纸，然后在无菌适宜条件培养12~16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述错误的是（   ）

A、图1中的培养基需冷却至50℃左右时再倒平板，该操作需要在酒精灯旁完成

B、图2中所示培养基的放置方式，能防止水分过快蒸发和冷凝水珠冲散菌落

C、图3培养皿上大肠杆菌的接种方式为涂布平板法，Ⅳ号纸片上抗生素浓度最高

D、图3所示的抑菌圈内出现大肠杆菌菌落的原因是链霉素使其发生了基因突变