如图表示构建基因表达载体所用的质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是 ， 限制酶Ⅱ的识别序列和切点是。据图分析，下列叙述正确的是（   ）

A、使用限制酶Ⅰ、Ⅱ切割可以防止目的基因自身环化

B、限制酶Ⅱ可以切割两种标记基因，所以没有特异性

C、可以用限制酶Ⅱ切割质粒、限制酶Ⅰ切割目的基因

D、将目的基因插入到四环素抗性基因内完成构建