某校生物社团为了探究“香烟烟雾溶解液对金鱼呼吸频率的影响”设计了如下实验：

①分别收集1、3、5、7、9支香烟完全燃烧产生的烟雾，并溶解于水中，制成相应的烟雾溶解液各100mL；

②选择大小相同的透明水槽6个，各注入放置了一昼夜的清水1500mL，标记为1～6号；

③向1号水槽中加入            ▲            mL的清水，2～6号水槽中分别加入不同浓度的香烟烟雾溶解液各50mL；

④向6个水槽内分别放入形态大小和生理状况大致相同的金鱼各3条，5分钟后观察并记录金鱼的呼吸频率；

⑤多次重复上述实验步骤；

⑥汇总分析数据，计算平均值，绘制成折线图如下：

⑦实验结束后将金鱼放生。

请回答下列问题。