黄瓜花叶病毒能感染多种植物，对烟草的危害尤其严重。病毒的Cu-4基因表达所形成的蛋白是子代病毒形成和释放的关键蛋白。研究人员利用农杆菌转化法获得能表达Cu-4基因反义RNA的转基因烟草，反义RNA与Cu-4基因转录获得的mRNA互补结合形成双链RNA，阻止了mRNA的翻译，从而获得了抵抗该病毒的能力。在Cu-4基因（A链是模板链）一侧连接了带有细菌启动子的四环素抗性基因（在植物细胞该基因会被完整切除），如图1所示。图2是Ti质粒相关基因图谱。

备注：

①Cu-4基因长度为300bp，tet^r基因长度为500bp。I-IV是四种引物。

②LB和RB是T-DNA的边界，XhoI和EcoRI是两种限制酶，切割后形成的黏性末端不互补。P_35S和T_RBC是仅在植物细胞中发挥功能的启动子和终止子。tet^r和amp^r分别是四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。所用农杆菌不具有氨苄青霉素、四环素和潮霉素抗性