“中天杨”是由我国科学家采用生物转基因技术，历经8年时间培育成功的抗盐碱、耐干旱的杨树新品种。该品种以八里庄杨为实验材料，经转mtl-D基因培育获得。如图为培育“中天杨”的操作流程，①~⑥表示操作过程，该过程中可能用到的限制酶如表所示。回答下列问题。

注：Ti质粒中的Tet^r为四环素抗性基因，Amp^r为氨节青霉素抗性基因。

限制酶	BclⅠ	EcoRⅠ	XbaⅠ	Sau3AⅠ	BamHⅠ
切割位点	T↓GATCA	G↓AATTC	T↓CTAGA	↓GATC	G↓GATCC