下列关于基因表达载体构建的相关叙述中，不正确的是（ ）

A、需要限制酶和DNA连接酶

B、抗生素抗性基因可作为标记基因

C、在细胞外进行

D、启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段DNA