利用HepG2 细胞能建立稳定的胰岛素抵抗模型,发生胰岛素抵抗的细胞活力可能会下降,姜黄素对细胞胰岛素抵抗可能有明显的改善作用。为探究上述问题,研究小组进行如下实验:实验器材:HepG2细胞悬液,细胞培养液,胰岛素,姜黄素,罗格列酮(一种胰岛素增敏剂)、其他测量所需仪器等。
(要求与说明:细胞活力与溶液吸光度成正比;培养液中葡萄糖含量的具体检测方法和吸光度检测方法不做要求。不考虑加入姜黄素和罗格列酮对培养液体积的影响,实验条件适宜。)
实验一:确定建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型的最佳胰岛素浓度。
实验过程:将HepG2细胞悬液接种于含0、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L胰岛素的培养液中,一段时间后测定相关指标。
实验结果:不同浓度体外胰岛素均会导致细胞产生胰岛素抵抗,且0~10-6mol/L范围内,浓度越大作用效果越明显,10-5mol/L组、10-4mol/L组与10-3mol/L组无明显差异。
实验二:探究胰岛素抵抗细胞的活力变化。
实验过程:将HepG2细胞悬液接种于含适宜胰岛素浓度的培养液中,在不同时间点检测细胞活力。实验结果如下表所示:
| 吸光度 |
时间 | 12h | 24h | 36h | 48h | 60h |
胰岛素组 | 1.238 | 1.484 | 1.322 | 0.905 | 0.602 |
实验三:探究姜黄素对胰岛素抵抗的改善作用。
实验过程:
①根据实验一、二,用适宜浓度胰岛素培养HepG2细胞适宜时间后,获得胰岛素抵抗HepG2细胞;
②利用以上实验材料进行实验分组;
③按照以上分组分别向培养瓶中加入相应实验材料,测量各组培养液中起始葡萄糖浓度,再分别向各培养瓶中加入____,培养一段时间后再次测量各组培养液中葡萄糖浓度。
实验结论:姜黄素能明显改善HepG2细胞胰岛素抵抗状态。
回答下列问题: