下图为某种单基因常染色体隐性遗传病系谱图（深色代表的个体是该遗传病患者，其余为表现型正常个体）。近亲结婚时该遗传病发病率较高，假定图中第Ⅳ代的两个个体婚配生出一个患该遗传病子代的概率为1/48，那么，得出此概率值需要的限定条件是（   ）

A、Ⅰ－2和Ⅰ－4必须是纯合子

B、Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4必须是纯合子

C、Ⅱ－2、Ⅱ－3、Ⅲ－2和Ⅲ－3必须是杂合子

D、Ⅱ－4、Ⅱ－5、Ⅳ－1和Ⅳ－2必须是杂合子