①基因工程打破了物种与物种之间的界限 ②基因治疗是基因工程技术的应用 ③载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞 ④所需要的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体 ⑤常使用的载体有大肠杆菌、质粒和动植物病毒等