科学拓展课上，某兴趣小组同学用如图所示装置，对人体呼出气体中氧气的体积分数进行了探究。加热前，硬质玻璃管内装有足量铜粉，注射器及玻璃管内充满人体呼出的气体，室温下测得总体积为500毫升。

⑴实验中，要让氧气和铜粉充分反应，同学们的操作方法是。

⑵实验结束后，立即测得装置内气体总体积为450毫升。

⑶分析数据得出结论：人体呼出气体中O₂的体积分数为。

⑷实验反思：查阅教材得知，人体呼出的气体中氧气的体积分数为16%，实验中测得的氧气体积分数与教材中的数据差异较大，其原因是。