想要对土壤中分解尿素的细菌进行分离与计数，下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的有(　　)

①土壤取样　②称取土壤　③稀释土壤溶液　④涂布平板　⑤微生物的培养

A、①②③④⑤

B、②③④⑤

C、③④⑤

D、②③④