防止杂菌污染、获得纯净的微生物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的基础。在用平板划线法接种微生物时，下列说法正确的是（    ）

A、接种环应用高压蒸汽灭菌法灭菌

B、每次划线结束都要对接种环灭菌

C、每次划线都要从上一次划线的起始端开始

D、经培养后，只有在最后一次划线上才会出现单菌落