纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素）的圆形滤纸，然后在无菌、适宜条件培养12~16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述错误的（    ）

A、图1中的培养基需冷却至50℃左右时再倒平板，该操作需要在酒精灯旁进行

B、接种后的平板在培养时的放置应如图2中的①所示

C、抑菌圈越大，说明大肠杆菌对链霉素的敏感性越小

D、图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落，可能是大肠杆菌发生了基因突变