图为某种单基因常染色体隐性遗传病的系谱图(深色代表的个体是该遗传病患者，其余为表现型正常个体)。近亲结婚时该遗传病发病率较高，假定图中第IV代的两个个体婚配生出一个患该遗传病子代的概率是1/48，那么，得出此概率值需要的限定条件是（ ）

A、I-2和I-4必须是纯合子

B、Ⅱ-1、Ⅲ-1和Ⅲ-4必须是纯合子

C、Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅲ-2和Ⅲ-3必须是杂合子

D、I-4、Ⅱ-5、IV-1和IV-2必须是杂合子