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某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)和DNA连接酶为工具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。下列重组表达载体构建方案中,合理且效率最高的是( )
A、质粒和目的基因都用酶4切割,用E.coliDNA连接酶连接
B、质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,用T4DNA连接酶连接
C、质粒和目的基因都用酶2和酶3切割,用E.coliDNA连接酶连接
D、质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用T4DNA连接酶连接
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